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Use este identificador para citar ou linkar para este item: http://bdtd.famerp.br/handle/tede/655
Tipo do documento: Tese
Título: Avaliação clínica e ecoepidemiológica de leveduras de interesse médico
Autor: Rezende, Cátia 
Primeiro orientador: Almeida, Margarete Teresa Gottardo de
Primeiro membro da banca: Siqueira, João Paulo Zen
Segundo membro da banca: Casella, Tiago
Terceiro membro da banca: Malta, Roberto Carlos Grassi
Resumo: A incidência das doenças fúngicas invasivas têm aumentado mundialmente tendo como principais patógenos o Cryptococcus spp e Candida spp. Vários fungos capazes de ocasionar patologias humanas são espécies ambientais, cuja patogenicidade evoluiu a partir das estratégias desenvolvidas no ambiente de estresse. Objetivos: Realizar uma avaliação clínica e ecoepidemiológica de isolados de leveduras de interesse médico. Material e Método: Amostras clínicas de líquor obtidas de pacientes portadores do vírus HIV com meningite foram analisadas quanto a presença de Cryptococcus spp. Os isolados foram identificados pelas características bioquímicas, com posterior análise genética pela técnica de RAPD para comparação filogenética. O perfil de suscetibilidade aos antifúngicos (fluconazol, itraconazol, anfotericina-B e 5-fluorocitosina) foi avaliado para todas as amostras, utilizando a técnica de microdiluição. Investigação ambiental em árvores e fezes de frangos de corte foi realizada para determinar a presença de leveduras de interesse médico, com possível correlação filogenética às amostras clínicas. Essas amostras também foram avaliadas quanto ao perfil de suscetibilidade aos antifúngicos, entretanto com a técnica de difusão em disco. Resultados: Quarenta isolados de Cryptococcus spp foram obtidos de 35 pacientes, sendo 39 identificados como C. neoformans e 1 com C. gattii. Cinco pacientes apresentaram isolados sequenciais (cada um com dois isolados). Trinta e seis (90%) pertenciam ao sorotipo A, 7,5% ao sorotipo AD e 2,5% ao sorotipo B. A análise de RAPD mostrou 6 grupos com 13 subgrupos, com elevado coeficiente de similaridade. A maioria dos isolados foi considerada sensível aos antifúngicos testados. Três isolados clínicos apresentaram colônias com produção tardia da enzima fenoloxidase, sendo a essas amostras acrescentadas as análises de quantificação da enzima fenoloxidase e análise genética utilizando enzimas de restrição e eletroforese. Não foi encontrada alteração no padrão genético com características fenotípicas nessas amostras. Quatrocentas amostras de material em decomposição de árvores foram analisadas no período de 2015 a 2016, com isolamento de C. tropicalis, C. albicans, C. krusei, C. glabrata, C. parapsilosis, C. guilliermondii e C. laurentii. Elevado percentual das amostras demonstrou resistência aos azóis. As amostras de fezes de frango de corte totalizaram 180, com maior porcentagem de isolamento de espécies não-albicans. Entretanto, as mesmas apresentaram elevado perfil de sensibilidade aos antifúngicos. Não houve isolamento de Cryptococcus spp nas amostras ambientais, não sendo possível realizar uma correlação filogenética com as amostras ambientais. Conclusão: Priorizar estudos ecoepidemiológicos são necessários para compreender o ecossistema que os fungos patogênicos estão inseridos, contribuindo na compreensão genética-fenotípica na patogênese. Fato esse essencial para implementação de técnicas diagnósticas e terapêuticas, assim como medidas preventivas com ênfase na prevenção de doenças na comunidade.
Abstract: The incidence of invasive fungal diseases has increased worldwide with Cryptococcus spp and Candida spp. Several fungi capable of causing human pathologies are environmental species whose pathogenicity evolved from the strategies developed in the stress environment. Objectives: To carry out a clinical and ecoepidemiological evaluation of yeast isolates of medical interest. Material and Method: Clinical samples of CSF obtained from patients with HIV were analyzed for the presence of Cryptococcus spp. The isolates were identified by biochemical characteristics, with subsequent genetic analysis by the RAPD technique for phylogenetic comparison. The antifungal susceptibility profile (fluconazole, itraconazole, amphotericin-B and 5-fluorocytosine) was evaluated for all samples using the microdilution technique. Environmental investigation in trees and feces of broilers was performed to determine the presence of yeasts of medical interest, with possible phylogenetic correlation to the clinical samples. These samples were also evaluated for the antifungal susceptibility profile, however with the disc diffusion technique. Results: Forty Cryptococcus spp isolates were obtained from 35 patients, 39 of whom were identified as C. neoformans and 1 with C. gattii. Five patients had sequential isolates (each with two isolates). Thirty-six (90%) belonged to serotype A, 7.5% to AD serotype and 2.5% to serotype B. RAPD analysis showed 6 groups with 13 subgroups, with a high coefficient of similarity. Most isolates were considered sensitive to the antifungal agents tested. Three clinical isolates presented colonies with late production of the enzyme phenoloxidase, adding to these samples the quantification analysis of the enzyme phenoloxidase and genetic analysis using restriction enzymes and electrophoresis. No change was found in the genetic pattern with phenotypic characteristics in these samples. Four hundred samples of decomposing material were analyzed in the period from 2015 to 2016, with isolation of C. tropicalis, C. albicans, C. krusei, C. glabrata, C. parapsilosis, C. guilliermondii and C. laurentii. High percentage of the samples showed resistance to azoles. Samples of feces of broiler chicken totaled 180, with a higher percentage of isolation of non-albicans species. However, they had a high antifungal sensitivity profile. There was no isolation of Cryptococcus spp in the environmental samples, and it was not possible to perform a phylogenetic correlation with the environmental samples. Conclusion: Prioritizing ecoepidemiological studies are necessary to understand the ecosystem that the pathogenic fungi are inserted, contributing in the genetic-phenotypic understanding in the pathogenesis. This fact is essential for the implementation of diagnostic and therapeutic techniques, as well as preventive measures with an emphasis on disease prevention in the community.
Palavras-chave: Procedimentos Clínicos
Critical Pathways
Micoses
Mycoses
Candida
Candida
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto
Sigla da instituição: FAMERP
Departamento: Faculdade 1::Departamento 1
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde
Citação: Rezende, Cátia. Avaliação clínica e ecoepidemiológica de leveduras de interesse médico. 2019. 115 f. Tese (Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde) - Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, São José do Rio Preto.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
Identificador do documento: 1534
URI: http://bdtd.famerp.br/handle/tede/655
Data de defesa: 31-Mai-2019
Aparece nas coleções:Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde

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