Exportar este item: EndNote BibTex

Use este identificador para citar ou linkar para este item: http://bdtd.famerp.br/handle/tede/647
Tipo do documento: Tese
Título: Efeito do peptídeo EL28 como adjuvante da vacina DENV3E
Autor: Silva, Elisabete Rodrigues do Monte 
Primeiro orientador: Nogueira, Maurício Lacerda
Primeiro coorientador: Costa, Vivian Vasconcelos
Primeiro membro da banca: Versiani, Alice Freitas
Segundo membro da banca: Mattos, Luiz Carlos de
Terceiro membro da banca: Mota, Mânlio Tasso de Oliveira
Resumo: O peptideo EL28 e um peptideo intracelular que parece ter uma contribuicao endogena com a atividade biologica do IFN-ƒÁ. Em um estudo anterior, Monte e colaboradores, o peptideo EL28 demonstrou habilidade em aumentar o titulo de anticorpos IgG anti-BSA, em camundongos. Alem disso, o peptideo EL28 ativou a proliferacao de celulas T CD8. Estes resultados sugerem que o peptideo EL28 possui um potencial como peptideo imunoestimulador, podendo ser utilizado como adjuvante na formulacao de vacinas. Objetivo: Neste estudo avaliamos a capacidade do peptideo EL28 em potencializar a resposta imune induzida pela vacina de subunidade DENV3E, aqui nesse estudo chamada por pE; uma construcao truncada da regiao transmembrana da glicoproteina E do DENV-3. Materiais e Metodos: Femeas de camundongos da linhagem C57/Bl6 foram imunizadas com uma combinacao da vacina pE e o peptideo EL28 e desafiados com o virus da dengue do tipo 3. Os niveis de expressao de celulas T CD8 e CD4, celulas de memoria central e efetora e expressao da citocina IFN-ƒÁ e da proteina viral nao-estrutural 3 (NS3), foram analisadas por citometria de fluxo para avaliar os efeitos imunoestimulatorios de EL28. A secrecao de citocinas tambem foi avaliada por ELISA. Para avaliar os sinais da doenca nos camundongos desafiados, tais como, plaquetopenia e hemoconcentracao, foi realizado a contagem de plaquetas, contagem diferencial e total de leucocitos, e hematocrito. Alem disso, foi realizado o ensaio com o corante Evans Blue para avaliar se houve alteracao da permeabilidade vascular entre os grupos controle e imunizados. Resultados: O esquema de vacinacao pE+EL28 foi capaz de reverter a plaquetopenia induzida pela infeccao com pE, assim como, estimulou a proliferacao de celulas totais do baco e de linfocitos T CD8+ e T CD4+. Entretanto, nosso modelo de infeccao nao foi capaz de induzir outros sinais da doenca, tais como, hemoconcentracao e aumento da permeabilidade vascular. Conclusao: Ao confrontar todos os grupos experimentais, o modelo utilizado nao foi o adequado para verificar o efeito do peptideo EL28. Novos estudos devem ser conduzidos a fim de adequar o esquema de imunizacao ao modelo experimental estudado.
Abstract: EL28 peptide is an intracellular peptide thar appears to have an endogenous contribution to the biological activity of IFN-γ. In a previous study, Monte et al., the EL28 peptide showed an ability to increase the titer of anti-BSA IgG antibodies in mice. In addition, the EL28 peptide activated T CD8 cells proliferation. The results suggest that the EL28 peptide has a potential as an immunostimulatory peptide and coud be used as an adjuvant in vaccine formulation. Objectives: In this study, we accessed the ability of EL28 peptide to boost the immune response induced for the DENV3E subunit vaccine, in this study called for pE, a truncated construct of the DENV3 glycoprotein E transmembrane region. Materials and Methods: Female C57/Bl6 mice were immunized with a combination of the pE vaccine and the EL28 peptide. After three immunizations, the animals were challenged with type 3 dengue virus. The expression levels of T CD8 and CD4 T cell expression, central and effector memory cells and IFN-γ cytokine expression and of the nonstructural viral protein 3 (NS3), for flow cytometry to assess the immunostimulatory effects of EL28. Cytokine secretion was also assessed by ELISA. In addition, the Evans Blue dye assay was performed to assess whether there was a change in vascular permeability between the control and infected groups. Results: pE+EL28 vaccination schedule was able to reverse thrombocytopenia induced by DENV3 infection, as well as, stimulated proliferation of total spleen cells and of CD8+ and CD4+ T-type lymphocytes. However, our infection model was not able to induce other signs of the disease, such as hemoconcentration and increased vascular permeability. Conclusion: When compare all experimental groups, EL28 showed no advantage as an adjuvant to the pE vaccine. Further studies should be conducted in order to adapt the immunization scheme to the experimental model studied.
Palavras-chave: Vacinas de Subunidades
Vaccines, Subunit
Dengue
Dengue
Vacinas
Vaccines
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto
Sigla da instituição: FAMERP
Departamento: Faculdade 1::Departamento 1
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde
Citação: Silva, Elisabete Rodrigues do Monte. Efeito do peptídeo EL28 como adjuvante da vacina DENV3E. 2020. 68 f. Tese (Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde) - Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, São José do Rio Preto.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
Identificador do documento: 1532
URI: http://bdtd.famerp.br/handle/tede/647
Data de defesa: 7-Fev-2020
Aparece nas coleções:Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde

Arquivos associados a este item:
Arquivo Descrição TamanhoFormato 
ElisabeteRodriguesdoMonteSilva_Tese.pdfDocumento principal3,17 MBAdobe PDFBaixar/Abrir Pré-Visualizar


Os itens no repositório estão protegidos por copyright, com todos os direitos reservados, salvo quando é indicado o contrário.