???item.export.label??? ???item.export.type.endnote??? ???item.export.type.bibtex???

Please use this identifier to cite or link to this item: http://bdtd.famerp.br/handle/tede/577
Tipo do documento: Dissertação
Título: Marcadores genéticos e bioquímicos no diagnóstico e prognóstico do carcinoma hepatocelular
Autor: Ferreira, Rafael Fernandes 
Primeiro orientador: Silva, Renato Ferreira da
Primeiro membro da banca: Oliveira, Claudia Pinto Marques Souza de
Segundo membro da banca: Zuccari, Debora Aparecida Pires de Campos
Terceiro membro da banca: Caldas, Heloisa Cristina
Resumo: Carcinoma hepatocelular (CHC) destaca-se como o mais agressivo tumor maligno do figado. A identificacao de marcadores geneticos e bioquimicos pode contribuir no esclarecimento da fisiopatologia do CHC e auxiliar no diagnostico precoce da doenca com novas intervencoes terapeuticas. Objetivos . Avaliar a associacao de variantes geneticas (VEGF-C936T e VEGF-A1154G), niveis sericos e expressao genica envolvidos no processo de angiogenese, protecao, comunicacao e sinalizacao celular com CHC. Casuistica e Metodos . Foram estudados 393 individuos, distribuidos em Grupo 1 (G1) . 102 pacientes com CHC; Grupo 2 (G2) . 117 pacientes com cirrose por qualquer etiologia; Grupo 3 (G3) . 33 pacientes com hepatite por virus C (VHC); Grupo 4 (G4) . 141 individuos sem sinal clinico ou bioquimico de qualquer hepatopatia (controle). Para analise de expressao genica de fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), ƒÀ-catenina, alfa-fetoproteina (AFP), cistatina-b (CSTB) e glipican-3 (GPC3), destes foram selecionados 26 pacientes com CHC, 16 com cirrose, 9 com VHC e 14 controles submetidos a cirurgias bileo-digestivas. Os polimorfismos foram analisados por PCR/RFLP (polymerase chain reaction/restriction fragments length polymorphism), expressao genica (tecido hepatico) por qPCR (quantitative/polymerase chain reaction) e niveis sericos por ELISA (Enzyme Linked ImmunonoSorbent Assay). Admitiu-se erro ƒ¿ de 5%. Resultados . Genotipo selvagem de ambos os polimorfismos de VEGF prevaleceu em todos os grupos (P>0,05). VEGF serico aumentado foi observado em G1 e G3, relacionado com o alelo mutante de VEGF-C936T e VEGF-A1154G, respectivamente, comparado com o genotipo selvagem (P=0,02; P=0,02), bem como em G1 versus G2 e G3 para VEGF-C936T, e G1 comparado a G2 para VEGF-A1154G (P<0,05, para ambos). Observou-se superexpressao de VEGF em G1 (3,85), comparado a G2 (0,76) e G3 (1,95;P=0,02, para ambos), assim como de VEGF e AFP em pacientes classificados no estágio D (19,97 e 8,86), comparado àqueles no estágio B (1,96 e 0,03; P = 0,008 e P = 0,001, respectivamente). Pacientes no estágio C apresentaram maior expressão de CTNNB1, comparado ao estágio B (18,40 versus 0,90; P = 0,008). Houve aumento de níveis séricos de GPC3 (2,8ng/mL), CSTB (0,99ng/mL), VEGF (264,8pg/mL) e AFP (20,3ng/mL) em pacientes com CHC comparado aos controles (2,9ng/mL, 0,6ng/mL, 185,2pg/mL, 2,6ng/mL; P<0,05 para todos). GPC3 e VEGF mostraram-se relevantes na discriminação entre G1 e G4 (área sob a curva = 0,82; 0,71, respectivamente). CSTB apresentou poder discriminatório na comparação entre os grupos com VHC e controle (área sob a curva = 0,74). Notou-se correlação positiva para expressão entre todos os genes, exceto de CSTB correlacionado apenas com CTNNB1 (r=0,43; P=0,01), e GPC3 com VEGF (r=0,49; P=0,008). Conclusão – Polimorfismos de VEGF-A (C936T e A1154G) não se associam com cirrose, CHC e sobrevida, entretanto, a presença dos alelos mutantes influencia níveis séricos de VEGF. Ressalta-se a sensibilidade de CSTB (proteção celular) sérico para diagnóstico de VHC, VEGF (angiogênese) e GPC3 (proliferação celular) séricos demonstram sensibilidade e especificidade para diagnóstico de CHC. Expressão aumentada, particularmente, de VEGF em pacientes com CHC em estágio terminal (BCLC-D) confirma VEGF como indicador de prognóstico na carcinogênese hepática. A correlação da expressão de VEGF com AFP, GPC3 e CTNNB1 sugere a integração entre marcadores de angiogênese, sinalização e proliferação celular em CHC e hepatite C.
Abstract: Hepatocellular carcinoma (HCC) stands out as the most aggressive malignant liver tumor. The identification of genetic and biochemical markers may help to understand the physiopathology of HCC and to make an early diagnosis of the disease with new therapeutic interventions. Objectives - To evaluate the association of genetic variants (VEGF-C936T e VEGF-A1154G), serum levels and gene expression involved in the angiogenesis process, protection, communication and cell signaling with HCC. Patients and Methods - A total of 393 subjects were studied, distributed into Group 1 (G1) - 102 patients with HCC; Group 2 (G2) - 117 patients with cirrhosis of any etiology; Group 3 (G3) - 33 patients with hepatitis C virus (HCV); Group 4 (G4) - 141 individuals without clinical or biochemical signs of any liver disease (controls). For gene expression analysis of vascular endothelial growth factor (VEGF), β-catenina (CTNNB1), Alpha-fetoprotein (AFP), Cystatin-B (CSTB) and Glypican-3 (GPC3), 26 patients with HCC, 16 with cirrhosis, 9 with HCV and 14 controls undergoing bileoenteric surgery were selected. The polymorphisms were analyzed by PCR/RFLP (polymerase chain reaction/ restriction fragments length polymorphism), gene expression (liver tissue) by qPCR (quantitative / polymerase chain reaction), and serum levels by ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). α -error was set at 5%. Results - Wild genotype both VEGF polymorphisms prevailed in all the groups (P> 0.05). Increased levels of VEGF were observed in G1 and G3, related to the mutant allele of VEGF-C936T and VEGF-A1154G, respectively, compared to the wild-type genotype (P=0.028; P=0.028), in G1 vs. G2 and G3 for VEGF-C936T, and in G1 compared to G2 for VEGF-A1154G (P<0.05 for both). Overexpression of VEGF in G1 (3.85) was observed, compared to G2 (0.76) and G3 (1.95; P=0.02 for both). Higher levels of expression of VEGF and AFP could be observed in patients classified into stage D (19.97 and 8.86), compared to those in stage B (1.96 and 0.03;P=0.008 and P=0.001, respectively). Patients in stage C showed higher expression of CTNNB1, compared to those in stage B (18.40 vs. 0.90; P=0.008). There was an increase of GPC3 (2.8ng/mL), CSTB (0.99ng/mL), VEGF (264.8pg/mL) and AFP (20.3ng/mL) in patients with HCC, compared to controls (2.9ng/mL, 0.6ng/mL, 185.2pg/mL, 2.6ng/mL; P<0.05 for all comparisons). GPC3 was relevant when discriminating G1 and G4 (area under the curve = 0.82). For VEGF, discriminatory power between HCC patients and controls (area under the curve = 0.71) was observed. CSTB showed discriminatory power when comparing groups with HCV and controls (area under the curve = 0.74). A positive correlation was observed for expression among all genes, except CSTB, which correlated only with CTNNB1 (r=0.43; P=0.01), and GPC3, which correlated only with VEGF (r= 0.49; P=0.008). Conclusion – VEGF-A polymorphisms (C936T and A1154G) are not associated with cirrhosis, HCC and survival, however, the presence of the mutant alleles may influence serum levels of VEGF. Emphasis should be given to the sensitivity of serum CSTB (cell protection) for the diagnosis of HCV, VEGF (angiogenesis) and serum GPC3 (cell proliferation) demonstrate sensitivity and specificity for the diagnosis of HCC. Increased expression, particularly of VEGF in patients with end-stage HCC (BCLC-D) confirms VEGF as a prognostic indicator in liver carcinogenesis. The correlation between VEGF expression with AFP and GPC3 CTNNB1 suggests integration of markers of angiogenesis, signaling and cell proliferation in HCC and hepatitis C.
Palavras-chave: Neoplasias
Neoplasms
Fígado
Liver
Carcinoma Hepatocelular
Carcinoma, Hepatocellular
Expressão Gênica
Gene Expression
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto
Sigla da instituição: FAMERP
Departamento: Faculdade 1::Departamento 1
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde
Citação: Ferreira, Rafael Fernandes. Marcadores genéticos e bioquímicos no diagnóstico e prognóstico do carcinoma hepatocelular. 2016. 100 f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde) - Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, São José do Rio Preto.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
Identificador do documento: 1315
URI: http://bdtd.famerp.br/handle/tede/577
Data de defesa: 5-Oct-2016
Appears in Collections:Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
RafaelFernandesFerreira_Dissert.pdfDocumento principal1,33 MBAdobe PDFDownload/Open Preview


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.