@MASTERSTHESIS{ 2020:350795025,
 	title = {Expressão diferencial dos genes e proteínas NTRK2-TrkB, KRASe HIF1Aem célula-tronco tumoral nas linhagens celulares de câncer de cabeça e pescoço SCC-28 e FADU},
 	year = {2020},
 	doi = "1544",
 	url = "http://bdtd.famerp.br/handle/tede/688",
 	abstract = "O câncer de cabeça e pescoço (CCP) é o sexto tipo tumoral mais incidente no mundo com aproximadamente 600.000 novos casos anualmente. Mesmo com avanços no tratamento, apresenta baixa taxa de sobrevida, que está relacionada com a presença de células-tronco tumorais (CTTs), uma subpopulação celular resistente à quimio e radioterapia, favorecendo a progressão tumoral. Uma proteína importante envolvida nesse processo é a Tropomiosina Relacionada à Quinase B (TrkB), capaz de ativar vias de proliferação como a do Kirsten Rat Sarcoma (KRAS). KRAS ativado por TrkB leva à sobrevivência celular, angiogênese e ativação do Fator Induzido por Hipóxia (HIF1A), uma subunidade capaz de estimular a transcrição de genes ligados a malignidade. Objetivos: Identificar e isolar CTTs de duas linhagens celulares de CCP (SCC-28- câncer de laringe e FADU-câncer de faringe); avaliar a expressão dos genes e proteínas NTRK2-TrkB, KRAS e HIF1A em CTTs e não-CTTs dessas linhagens. Material e Métodos: As linhagens celulares foram cultivadas em meio DMEM suplementado e posteriormente caracterizadas e separadas por citometria de fluxo utilizando o biomarcador Aldeído Desidrogenase (ALDH) pelo equipamento FacsAria. Os ensaios de invasão, migração e formação de esferas tumorais foram realizados para validar a separação das populações de CTTs e não-CTTs. A expressão gênica foi realizada pela técnica de Real-Time PCR e a expressão proteica pela técnica de Western Blotting. Resultados: O biomarcador ALDH foi eficiente para identificar e isolar CTTs das duas linhagens celulares avaliadas. As CTTs apresentaram maior capacidade de invadir (SCC-28 p=0,0097, FADU p=0,0029) e migrar (SCC-28 p=0,0253, FADU p<0,0001) quando comparadas com as não-CTTs. Também foi possível observar a maior capacidade de formação de esferas tumorais para as CTTs da linhagem celular SCC-28 (p=0,0030) com relação as não CTTs, entretanto não houve diferença estatisticamente significante para a FADU (p=0,5810). Na linhagem SCC-28 demonstrou-se expressão gênica aumentada de KRAS (p=0,0002) nas CTTs quando comparadas as não-CTTs, entretanto essa diferença estatisticamente significante não ficou evidente para o gene HIF1A (p=0,0730), e não foi possível detectar a expressão gênica do NTRK2. Na linhagem FADU, as CTTs apresentaram expressão gênica aumentada de NTRK2, KRAS e HIF1A (p<0,0001, p=0,0005 e p<0,0001 respectivamente) comparadas as não-CTTs. Na análise de expressão proteica, observou-se aumento de expressão de TrkB, KRAS HIF1A nas CTTs das linhagens SCC-28 (p=0,0001, p=0,0004 e p=0,0007, respectivamente) e FADU (p=0,0064, p=0,0156 e p=0,0103, respectivamente) quando comparadas com não-CTTs. Conclusão: O biomarcardor ALDH pode ser utilizado para identificar e isolar CTTs do CCP e esta população celular apresenta maior capacidade de invadir, migrar e formar esferas tumorais. Os genes e proteínas NTRK2, KRAS e HIF1A apresentam expressão aumentada nas CTTs quando comparadas com não-CTTs, podendo ser alvos promissores para o desenvolvimento de novas terapias contra o câncer.",
 	publisher = {Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde},
 	note = {Faculdade 1::Departamento 1}
}