@MASTERSTHESIS{ 2020:1310292487,
 	title = {Validação do miR-17-5p e miR-637 na expressão e regulação dos genes VEGFA e NFE2L2 em câncer de cabeça e pescoço in vitro},
 	year = {2020},
 	doi = "1560",
 	url = "http://bdtd.famerp.br/handle/tede/671",
 	abstract = "O Câncer de Cabeça e Pescoço (CCP) inclui tumores localizados na língua, cavidade oral, laringe, orofaringe, hipofaringe, faringe e seios paranasais. Angiogênese é a formação de novos vasos sanguíneos a partir de vasos pré-existentes, e leva a nutrição e desenvolvimento do tumor. O Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF) é fundamental no processo angiogênico. O Fator Nuclear Eritróide 2-like2 (NFE2L2) tem função de regular a expressão de vários genes, citoprotetores e antioxidantes, sendo o principal regulador do estresse oxidativo celular. MicroRNAs (miRNAs) são pequenas moléculas de RNA constituídas de aproximadamente 22 nucleotídeos envolvidos na regulação gênica. Objetivos: Avaliar a expressão gênica e proteica de VEGFA e NFE2L2 e expressão dos miRNAs hsa-miR-17-5p e hsa-miR-637 em linhagens de CPP e investigar a relação dos genes com os esses micros. Materiais e Métodos: Foram utilizadas as linhagens HEp-2, FaDu e HN13. As quantificações dos genes e dos miRNAs foram realizadas por meio da técnica de PCR em tempo real quantitativa (PCRq). A quantificação das proteínas VEGFA e NFE2L2 foi realizada por Western Blotting. Para avaliar a regulação gênica pelos miRNAs, as linhagens foram transfectadas com o inibidor do miR-17-5p e o mimetizador do miR-637 e quantificada a expressão dos genes VEGFA e NFE2L2. Resultados: O gene VEGFA não apresentou regulação pelo miR-637 nas linhagens HEp-2 e HN13. Na FaDu, houve um aumento na expressão do VEGFA (p=0,0313). Em relação ao miR-17-5p, o VEGFA teve sua expressão aumentada nas linhagens HEp-2 (p=0,1563) e HN13 (p=0,1563), e não houve regulação desse gene na FaDu (p=0,6875). A expressão do NFE2L2 foi aumentada na HEp-2, tanto nas células transfectadas com miR-637 (p=0,0313) quanto com miR-17-5p (p=0,1563). Na linhagem FaDu a expressão do NFE2L2 também foi aumentada com o miR-637 (p=0,0313), porém não apresentou regulação pelo miR-17-5p (p=1,0000), enquanto que na HN13 não houve regulação nas células com miR-637 (p=0,8438) e com miR-17-5p (p=0,1250) houve um aumento da expressão do NFE2L2. Nas linhagens HEp-2 e HN13, a expressão proteica VEGFA foi levemente aumentada após a transfecção com o miR-637 (HEp-2 p=0,3374; HN13 p=0,4698), e reduzida com miR-17-5p (HEp-2 p=0,1948; HN13 p=0,48047). Na FaDu, VEGFA foi reduzida com miR-637 (p=0,3414), e aumentada com miR-17-5p (p=0,5004). Os valores de expressão proteica foram comparados com seus respectivos controles negativos do mimics e inibidor. A proteína NFE2L2 foi aumentada nas linhagens FaDu e HN13 (p=0,2792; p=0,2382) nas células com miR-637 quando comparadas ao controle negativo (p=0,1870; p=0,0393), já na HEp-2 (p=0,2186) houve uma pequena redução em relação ao controle (p=0,2940). Nas células tranfectadas com miR-17-5p, nas linhagens HEp-2 e HN13 não houve diferença de expressão entre as células tranfectadas (p=0,1714; p=0,0803) e o controle (p=0,1026; p=0,0743), enquanto que na FaDu houve uma pequena redução (p=0,2972) em relação ao controle (p=0,3642). Conclusão: O miR-17-5p é capaz de regular a expressão do gene VEGFA e NFE2L2 em linhagens de CCP. Os resultados mostram que existem mecanismos envolvidos na regulação dos genes VEGFA e NFE2L2 pelos miRNAs hsa-miR-637 e hsa-miR-17-5p, entretanto diferentes sítios anatômicos podem influenciar no perfil de regulação e expressão.",
 	publisher = {Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde},
 	note = {Faculdade 1::Departamento 1}
}