@PHDTHESIS{ 2019:1846403832,
 	title = {Identificação e expressão gênica de células tronco tumorais no câncer de cabeça e pescoço e a resposta à quimioterápicos},
 	year = {2019},
 	doi = "1490",
 	url = "http://bdtd.famerp.br/handle/tede/656",
 	abstract = "O câncer de cabeça e pescoço (CCP) é o quinto tipo de câncer mais comum no Brasil e baixa taxa de sobrevivência. O tratamento apresenta resultados pouco favoráveis devido à resistência tumoral. Possivelmente por uma pequena subpopulação de células, denominadas células-tronco tumorais (CTTs) que apresentam capacidade de autorenovação e iniciação tumoral, identificadas por meio de biomarcadores de superfície, tais como CD44, CD117, CD133 e ALDH. Além disso, tem sido evidenciada a alta expressão de genes da progressão tumoral como o Receptor do Fator de Crescimento Epidérmico (EGFR) e o Receptor Tirosina Kinase (TrkB) que ativam a cascata de sinalização por meio do gene Kirsten Ras Oncogene Homólogo (KRAS). Objetivos: Identificar e separar as células tronco tumorais por meio de biomarcadores moleculares; avaliar o potencial tumorigênico das CTTs bem como a eficácia do tratamento e analisar a expressão dos genes CD44, TrkB, EGFR e KRAS em CTTs de CCP. Materiais e Métodos: Para a identificação e separação das CTTs foi utilizado equipamento FACSAria Fusion. Após a separação, as células foram testadas paras os ensaios de migração, invasão e formação de esferas. Também foram submetidas ao tratamento com 0.37 mg/mL de 5-fluorouracil, 2.0 mg/mL de cisplatina, 0,06mg/ml de cetuximabe e 0,05mg/ml de paclitaxel por 24h, e analisada a viabilidade celular por meio do ensaio de MTS. A expressão gênica de CD44, TrkB, EGFR e KRAS foi avaliada pelo método de PCR quantitativo, utilizando-se as não-CTTs como controle relativo da reação. Resultados: CTTs foram identificadas e separadas por meio dos biomarcadores CD44, CD117 e CD133 em combinação e do ALDH1 isolado. A avaliação do potencial tumorigênico das CTTs separadas por meio dos biomarcadores mostrou maior migração, potencial de invasão e formação de esferas quando comparadas as não-CTTs (p<0,0001, p=0,0324 e p=0,0013). A eficácia dos tratamentos avaliados não apresentou diferenças estatísticas entre CTTs e não-CTTs. A subpopulação de CTTs apresentaram alta expressão gênica de CD44 (RQ=102,775) e baixa expressão de EGFR (RQ=0,741) na linhagem celular de câncer oral-HN13 e baixa expressão de CD44 (RQ=0,658), alta expressão de EGFR (RQ=7,559) e KRAS (RQ=1,482) e não houve expressão de TRKB na linhagem celular de câncer de laringe-HEP2. Nos tumores primários os genes EGFR (média de RQ=7,081) e KRAS (média de RQ=1,568) foram encontrados altamente expressos nas CTTs, porém, não houve diferença estatística entre as duas subpopulações (p=0,5625 e p=0,5296, respectivamente). Conclusão: As marcações com CD44/CD117/CD133 em combinação e ALDH isolado são eficientes para separar subpopulações de CTTs em CPP. As CTTs apresentam potencial tumorigênico mais agressivo e relativamente mais resistente aos tratamentos estudados. Em linhagem de câncer oral o gene EGFR foi encontrado subexpresso e o gene CD44 superexpresso, entretanto, em linhagem celular de câncer de laringe foi encontrado o inverso além da superexpressão do KRAS e expressa tardia do gene TrkB. O que corrobora com os achados em tumores primários expressando altamente os genes EGFR e KRAS nas CTTs. Este estudo contribui na compreensão dos mecanismos de proliferação celular, resistência e recidiva ao tratamento do CCP por meio da caracterização das CTTs.",
 	publisher = {Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde},
 	note = {Faculdade 1::Departamento 1}
}